Циклге қарсы цитрулинделген пептид (CCP) антиденелерінің ELISA жинағы

Бұл жинақ жанама әдіс негізінде адам сарысуы үлгілерінде циклдік цитрулинделген пептидке қарсы антиденелерді (CCP антиденелер) анықтайды, бұл ретте жабын антигені ретінде тазартылған циклдік цитрулинделген пептидті антигендер қолданылады.

Сынақ процесі сарысу үлгісін жоғарыда аталған тазартылған антигендермен алдын ала қапталған реакциялық ұңғымаларға қосудан басталады, содан кейін инкубациялық кезең. Осы инкубация кезінде, егер үлгіде CCP антиденелері болса, олар тұрақты антиген-антидене кешендерін құра отырып, микротүтіктерде қапталған циклдік цитрулинделген пептидті антигендерді арнайы танып, байланыстырады. Кейінгі қадамдардың дәлдігін қамтамасыз ету үшін реакциялық ұңғымалардағы байланыспаған компоненттер жуу процесі арқылы жойылады, бұл сарысудағы басқа заттардың ықтимал кедергілерін жоюға көмектеседі.

Содан кейін фермент конъюгаттары реакция ұңғымаларына қосылады. Екінші инкубациядан кейін бұл фермент конъюгаттары антиген, антидене және фермент конъюгатын қамтитын үлкенірек иммундық кешен құра отырып, бар антиген-антидене кешендерімен арнайы байланысады. Жүйеге TMB субстратының ерітіндісін енгізген кезде конъюгаттағы фермент TMB субстратымен химиялық реакцияны катализдейді, нәтижесінде көрінетін түс өзгереді. Бұл түс реакциясының қарқындылығы бастапқы сарысу үлгісінде бар CCP антиденелерінің мөлшеріне тікелей байланысты. Соңында микропластинаны оқу құралы реакция қоспасының сіңіру қабілетін (А мәні) өлшеу үшін қолданылады. Осы сіңіру мәнін талдау арқылы үлгідегі CCP антиденелерінің деңгейін дәл анықтауға болады, бұл тиісті клиникалық сынақтар мен диагностика үшін сенімді негіз береді.